酶活性分析法检定蛋白质

方法步骤：
1） 吸取20 μL 的蛋白质样本，小心注入微量滴定盘中，避免气泡产生。
2） 每一样品槽加入200 μL 基质液，混合均匀；可用烧热的接种环去除气泡。
3） 静置约1~2 min，颜色开始加深，然后加入30 μL 终止液。 反应时间的长短，要以样本中的酶活性大小來做调整。因为我们只测定色析法各分划的相对酶活性，因此并不加终止液。
4） 以ELISA 光度计测定波长415 nm 的吸光值。

酶活性单位的测定：
a. 以上步骤，只可测定GUS 活性的相对大小，对色析法所得到的各个分划进行侦测，相当方便，但并非酶活性单位的测定方法。
b. 若要测定酶的活性单位，要使用zui适当的酶用量，使酶在反应一段固定的时间后，其生成物的呈色吸光度，落在光度计的可测范围的内；然后计算此段时间内，每分钟所产生的吸光度增加量，转换成生成物的莫耳数，即可求得其真正的活性单位。
c. 因此酶的活性单位定义为：每分钟所能催化生成物的 μmole 数。

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