琼脂糖胶体电泳 （agarose gel electrophoresis）

仪器用具：
迷你电泳槽及铸胶器 （Mupid II）；UV transilluminator 及影像分析系统；防护面罩

药品试剂：
琼脂糖粉末 （agarose, low EEO）
1×TAE电泳缓冲液 （40 mM Tris-acetate, 1 mM EDTA, pH 8.0）：
由50×TAE （每1 L含242 g Tris base, 57.1 mL glacial acetic acid, 100 mL的0.5M EDTA-8.0） 稀释使用。
10×追踪染剂 （0.25% bromophenol blue, 0.25% xylene cyanol, 0.1 M EDTA, 50%glycerol）
Ethidium bromide （EtBr） stock solution：500 μg/mL，装于滴瓶中，每50 mL胶体溶液加一滴 （zui终浓度为0.5 μg /mL）
DNA 标准分子量：
DNA/HindIII fragments：包含8 个片段23.1, 9.4, 6.5, 4.3, 2.3, 2.0, 0.56, 0.125kb ，浓度为0.5 μg/μL，以下简称 λMr。
1 Kb DNA Ladder Fragments： 250 bp~10 kb共14 个DNA片段，浓度为0.5 μg/μL，以下简称LadMr。

方法步骤：
1） 每组制备一片12-well 1.2% agarose gel： 秤取适量agarose 粉末，加入1×TAE（大片Mupid II 胶片约需40 mL），以微波爐加热溶解后，置55℃水浴降温。
◆ Ethidium bromide 为突变剂，以下操作请务必戴手套，并禁止戴着手套的手到处亂摸！
2） 加入EtBr （每50 mL 胶体溶液加一滴stock solution），混合均匀，将胶体溶液倒入铸胶模，插上样本梳。置室温凝结后，小心拔开样本梳，将胶片置于电泳槽中，倒入1×TAE，直至溶液盖过胶片。
3） 样品DNA 及DNA 标准分子量各加入1/10 体积的10×追踪染剂。将样品及λMr 置65℃水浴5~10 min，移至冰浴降温后，即可加入胶片的样品槽。
◆ LadMr 请勿加热！
4） 以50V 或100V 进行电泳，待追踪染剂bromophenol blue 行进至胶体三分的二处时，关闭电源，取出胶片，以UV transilluminator box 观察色带位置，并照相记录结果。
◆ 请务必戴防护面罩，以免受到UV 伤害。
5） 与标准分子量比较，估计各DNA 片段的分子量并建立质体pBluescript 的限制图谱。
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