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  • 201212-11
    影响标记蛋白的主要因素

    该系统的主要影响因素是因在蛋白上引入标记物可导致蛋白生物活性改变,因为标记的结果,本质上是制造了一个由目的蛋白和标记物氨基酸序列融合而成新的蛋白。因此,使用该技术时,应该认识到是研究新的蛋白特性,而不是研究蛋白的原来特性。但实践经验表明这并不成为很大的问题,通过标记蛋白获得的信息可以采用针对原始未标记蛋白的抗体证实。第二方面的主要影响因素是在进行表位标记时,许多目前使用的标记物是由已知的蛋白(如myc基因产品)片段组成。这意味着抗标记物抗体不仅识别被研究的标记蛋白,同时还可能...

  • 201212-11
    抗原结合到抗体微珠基质层析柱上

    将抗原结合到抗体微珠基质上的zui简单方法是将微珠装到一个层析柱内,将抗原溶液流经层析柱,当抗原流经层析柱时结合到抗体上而被固定,直到洗脱时才洗脱下来。这种方法的效率是根据抗原与固定的抗体之间的接触时间决定的,所以抗原抗体之间的作用时间可以用低流速而延长。这种方法zui大一个问题就是某些蛋白非特异性结合到分离柱上,这些蛋白可以出现在洗脱液中,从而使纯化效率降低。基质本身和抗体基质复合物具有与待检抗原溶液中蛋白质非特异性结合的表面活性。虽然这些反应较正常的抗原—抗体反应要弱得多...

  • 201212-8
    淋巴细胞脉络丛脑膜炎实验室诊断与结果分析

    淋巴细胞脉络丛脑膜炎(1ymphocyticchoriomeningitis)是由淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒引起的急性传染病。临床表现多样,典型表现为急性无菌性脑膜炎,严重者可出现脑膜脑炎。该病一般为自限性,预后良好。[病因学]淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒属沙粒病毒属,为RNA病毒,是zui早发现与人类无菌性脑膜炎相关的病毒之一。病毒先侵入呼吸道上皮细胞繁殖,然后进入血液循环致病毒血症,此期可通过血脑脊液屏障而致脑膜、脉络丛有淋巴细胞及单核细胞浸润,脑实质水肿等病变。[实验室诊断]...

  • 201212-8
    狂犬病实验室诊断与结果分析

    狂犬病(rabies)是狂犬病毒引起的传染病。犬、猫、狼是狂犬病毒的主要储存宿主。人被病犬(或病猫等)咬伤后,病畜唾液中的病毒经伤口侵入人体,沿周围神经(主要是感觉神经)至背根节经脊髓人脑而致病。[病因学]狂犬病病毒是负链RNA病毒,属弹状病毒科的弹状病毒属。该病毒编码两种主要蛋白,一种为G蛋白,它是病毒包膜外突起的基本单位,诱导产生中和抗体;另一种为病毒颗粒内部的N蛋白,诱导补体结合抗体、荧光抗体等,根据狂犬病病毒N、G基因的遗传差异,狂犬病病毒可分为6种基因型,其中1~4...

  • 201212-6
    蛋白芯片技术的基本原理与技术的研究现状

    在多年的蛋白芯片技术的研究过程中,研究者为了寻找合适的物质作为蛋白的载体进行了不懈的探索。例如日本学者利用含有阳离子表面活性剂(HTAB)脂质体作为载体,通过戊二醛作用使其与一种铁蛋白包裹外壳的成分结合组装制备成一种纳米水平的装配体,这种装配体可以在适当的pH条件下使铁蛋白分子进入并固定于包裹外壳内面,形成蛋白质的载体。有人利用某些固体表面或覆盖上含有电解质的薄膜作为载体,可以将胶体蛋白质颗粒成分转移至薄膜上形成蛋白芯片。Uetz等在分析啤酒酵母基因组序列全长度阅读框架编码各...

  • 201212-6
    蛋白芯片技术的应用研究存在的问题及应用前景

    Ge在蛋白质的相互作用的研究中,采用了一种通用的蛋白质芯片系统,该系统敏感有效,用途广泛,可定量测定及重复使用,而且操作简易。Gavin等应用蛋白芯片技术观察代谢过程有关作用物和酶的相互作用关系。他们选择3对蛋白激酶与作用物系统,即依赖3,,5,—磷酸蛋白激酶—Kemptide;酪蛋白激酶Ⅱ—蛋白质磷酸酶抑制因子2和p42促有丝分裂剂激活蛋白(MAP)激酶(ErK2)—ElKl,首先将各系统的作用物按顺序固定于3张BSA-NHS玻片上,分别在有核素7-s’PATP的环境中与不...

  • 201212-4
    NDV的常规分离与鉴定新城疫

    病毒分离是诊断NDzui为确切的一种方法,并且可以为感染的毒株定性。通常采用鸡胚接种的方法分离NDV,也可用鸭胚、鹌鹑胚或鸡胚成纤维细胞等。病毒分离时取患病鸡的脑、脾、肺等组织的匀浆混合物,加抗生素处理后,接种于鸡胚或其他禽类胚的尿囊腔或鸡胚成纤维细胞中。组织样品须反复冻融3次以上,以确保病毒分离的成功。病料接种鸡胚后,一般培养36~96h鸡胚发生死亡,可见胚体的头、翅、颈、胸等处出血,尿囊液清朗,内含大量病毒,呈现较高的血凝性。分离病毒时还应结合相应的血凝和血凝抑制试验等方...

  • 201212-4
    单克隆抗体技术检测新城疫

    单克隆抗体仅仅识别一个抗原位点,用抗病毒蛋白的单克隆抗体就可以检测出各种病毒毒株表面抗原之间的微小差异,从而通过抗原差异来研究病毒的变异并可对其分群归类。20世纪80年代以来,国内外很多实验室已制备出多株NDV单克隆抗体,并用其测知NDV有很多变种。Russell等在1983年zui早以Ulster2C弱毒株为抗原研制出针对新城疫病毒不同多肽成分的9株单克隆抗体,将新城疫病毒的毒株分为A—H8个群,同一群中的病毒与这些单抗的反应谱相同,大多数具有共同的生物学和流行病学特征。随...

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